弧菌的种类和防治方法

在近几年的养殖中,EMS闹得很凶,各养殖区域发生严重的病害,造成大量养殖失败。专家教授们的研究成果之一,是弧菌在作祟。

引起人类疾病的有霍乱弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌(Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus)

引起水生动物疾病的有霍乱弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维弧菌、鳗弧菌、创伤弧菌等。(Vibrio cholerae, Vibrio alginolyticus, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio Harvey, eel Vibrio vulnificus)

在对虾养殖中,常听说黄弧菌和绿弧菌,到底怎么回事呢?

弧 菌在普通培养基上形成圆形、 平滑、灰白色的菌落。在选择性(显色培养基)TCBS上生长,代谢物使培养基的指示剂变色,而不是弧菌本身呈黄色或绿色,也不是它菌落呈黄色或者绿色。要 注意的是,黄弧菌、绿弧菌并非分类学上的说法,只是对某一代谢特征的弧菌的诸多种群的“方便”说。

注意:变色的是培养基的指示剂,而非弧菌本身;而且,在弧菌选择培养基上也并非只有弧菌可以生长。因此,在使用TCBS培养基培养出来的并不一定是弧菌。这就是TCBS培养基作为病原鉴定方面的不足。

比如:

绿色:副溶血弧菌、河流弧菌、恶臭假单胞菌(Vibrio parahaemolyticus, Vibrio river, Pseudomonas putida)

黄色:溶藻弧菌、霍乱弧菌、哈维弧菌、鳗弧菌、温和气单胞菌(Alginolyticus, Vibrio cholerae, Harvey Vibrio anguillarum, Aeromonas bacteria)

淡黄无色:变形杆菌、肠球菌

蓝色:假单胞菌、气单胞菌(Pseudomonas, Aeromonas)

蓝绿色:创伤弧菌(Vibrio vulnificus)

中间黑,边缘黄:变形杆菌

 

在 对虾养殖上,弧菌引发的疾病主要有瞎眼、红腿、红体、发光、肠炎,还有最严重的EMS.;引起瞎眼的是霍乱弧菌-非01群,感染对虾的眼睛,引起对虾眼睛 颜色变浅、白点、溃烂,严重时整个眼球烂掉,仅剩眼柄。引起红腿、红体、肠炎的一般有溶藻弧菌、副溶血弧菌、鳗弧菌等,红尾红腿往往是早期的症状,继而出 现肠炎和肝胰腺发红、重大或萎缩,严重的引起菌血症-“红体病”。

引起发光病的主要是哈维弧菌,又称荧光弧菌。感染的对虾体色变淡,肌肉白浊,病虾或死虾在暗室中发出淡蓝色光。

近年来闹得最凶的EMS,据说是副溶血弧菌,在诸多专家学者的研究中表明,副溶血弧菌感染确有与当前EMS相吻合的症状和流行规律。但在我们的技术服务中发现,EMS的发病很多与养殖环境恶化、养殖前期管理不善有关。

弧菌的感染途径主要是经口传播,其次是通过体表创伤和鳃进入体内弧菌通过主动粘附在消化道或创伤口,破坏表皮,进入体内,导致炎症和组织的溃烂、坏死或萎缩等。

对于弧菌的防治,大多数采用赶尽杀绝的做法。近年来,发现这种做法并不理想。

关 于水体弧菌的控制;在了解控制方法之前,先了解几个常见的“怪”现象;很多高位池,蓄水池用50PPM以上的漂白粉消毒,3-4天后,蓄水池的弧菌比进水 时还高;很多长期监控弧菌数量的养殖场,发现弧菌超标时往往高浓度泼洒消毒剂,第二天弧菌减少了90-95%,但第三天弧菌恢复原来数量,第四天高出第三 天数倍。这就是我上面所说用赶尽杀绝的方法控制弧菌不利的原因。

控制弧菌常用4种方法:(虾体外-水质)

第一种是消毒,虽说容易反弹,但作用快,仍是在弧菌超标时应急使用的一种好方法。

第二种是以菌杀菌常用的是弧菌的敌人复合菌种的在水体中抗衡弧菌,如 Pro-H2O Care (复合水医生) 控制弧菌的数量不致过高。

第三种是以菌制菌通过符合有益微生物从数量上抑制弧菌发病。如 Pro-Bacillus (复合芽孢杆菌)  和  Supra Cell Enzyme (菌酶酵素) 一般检测弧菌上,水体:总弧菌<1000cfu/ml ,绿弧菌<100cfu/ml是安全的。高于上述阀值,就会发病。然而,很多池塘的水体检测的弧菌远远高于上述理论阀值,对虾扔很安全。研究表明,当环境 中的弧菌数量超过理论阀值,但水体中总异养菌的数量达到弧菌数量的30倍以上,对虾仍是安全的;所以通过培养水中的总异养菌,是防治弧菌的一种很好的措 施。近年来的生物絮团养殖模式用于防治弧菌病,就是应用这个机理。

第四种是改变弧菌赖以生存的条件,如盐度、氧化还原电位等。

 

对虾体内弧菌的控制。一般有3种方法:

第 一是控制水环境的弧菌。对虾的消化道与水体相同,水体的微生物组成直接影响对虾消化道的菌相组成。所以水环境中弧菌 数量少,就可以预防消化道弧菌感染。这就是水体泼药的主要意义(请参考上面控制弧菌常用4种方法:(虾体外-水质))的。第二是控制肠道的弧菌侵袭感。常用的有定值能力的乳酸菌,在肠道形成优势种群,粘附在肠道 表皮形成生物屏障,使弧菌粘不到肠壁上,避免感染。就好像 Supra Cell Enzyme (菌酶酵素) 同时,乳酸菌分泌的乳酸,减低弧菌的毒理。毒力;第三种,就是天然抗菌药啦。大家都知道内服天然抗菌素和中草药。对抗弧菌效果还是很明显的, 就好如 Ultra-Immune Booster (复合免疫精华) 但是拌料很关键,有很多养殖户却似白忙活,因为拌料方法不当,撒料过程中,饲料表面的成分在下沉重被洗的干干净净;对虾弧 菌病的预防也是看疾病的轻重缓急,采取相应的方法处理。

正确的拌料方法:将可以溶解的成分溶解到水中,可以渗透到饲料里,不易流失。不溶于水的粉剂一般要用粘合剂,而且拌料后要晾干30分钟以上,待表面干燥。

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实验A) 是在一家户外养殖虎虾的池,屡次收弧菌侵袭的池。海水样本是在还没放H2O care 之前被拿取。 就如说的,弧菌菌落实很多。我们用的是TCBS 培养基,(先注明:不同TCBS厂家,有不同的配方和菌落解释). 青/蓝色的一般就是副溶血弧菌、河流弧菌,溶藻弧菌、霍乱弧菌。而黄色的一般就是就是溶藻弧菌、霍乱弧菌
实验A) 同一个池 – 放了2 次疗程 Pro-H2O care 后的三天后的的TCBS菌落,很明显弧菌的菌落减少很多了
实验B) Line A -室内海水养殖 (虎斑)- 使用Pro-H2O 前的TCBS 菌落, (照TCBS 厂家说明书, 菌落的直径3-5mm 以上的,才算是弧菌。至于小于1-2mm,可被解读为其它杂菌。
实验B) Line A – 使用Pro-H2O Care 的五天后 (前前后后三次疗程: 500g, 250g, 250g)的的TCBS 菌落, 很明显致命性的青色菌落 (副溶血弧菌,创伤弧菌)几乎是消失踪影了! 剩下的黄色小点菌落,都是少于1-2mm, 所以几乎断定不是弧菌,而是杂菌!